做免疫试剂开发、抗体生物素化实验的科研人，大概率都踩过这些坑：偶联效率忽高忽低、检测灵敏度频频掉线，明明操作步骤没出错，实验结果却始终无法复现。其实背后藏着一个容易被忽略的“隐形元凶”——抗体聚集！
抗体作为生物实验的“核心选手”，在储存、运输或实验处理过程中，很容易悄悄“抱团”形成二聚体、多聚体甚至更大聚集体。这些看不见的聚集物会导致微球表面抗体覆盖不均，有效修饰表位减少，不仅拉低实验效率，还会干扰检测结果的准确性，让前期投入的时间和样本都白费。
想要精准识破抗体聚集的“小把戏”，动态光散射法（DLS）必须拥有姓名！作为科研圈公认的快速无损检测技术，它就像一双“火眼金睛”，能通过捕捉溶液中抗体布朗运动引发的散射光强度变化，结合Stokes-Einstein方程，精准算出抗体的流体力学直径和多分散指数（PDI），让聚集问题无所遁形。
简单来说，激光照射样品后，小颗粒运动速度快，散射光信号波动衰减迅速，大颗粒则相反。通过解析相关函数曲线，就能清晰获取抗体粒径分布的核心信息，无需复杂处理，就能快速判断抗体状态。
不过想要用DLS拿到可靠数据，测试前的准备工作得做足：
- 样品浓度建议控制在1-2mg/mL，最高不超过5mg/mL，还需验证不同稀释度的一致性；
- 比色皿可根据样品体积灵活选择，哪怕是2μL以下的超微量样品也能适配；
- 仪器设置上，25℃是常用温度，水溶液折射率默认33，选择90°或173°背散射检测，能减少多重散射对高浓度样品的影响。
拿到DLS报告后，重点盯紧三个核心指标就够了：
- 粒径分布：单体抗体主峰通常在10-15nm，15-30nm出现小峰可能是二聚体/多聚体，若出现大于100nm的峰则提示严重聚集；
- PDI值：≤0.05为高度均一样品，05-0.7含少量聚集，大于0.7则聚集严重，优质抗体的PDI应≤0.2；
- 单体比例：以主峰面积占比衡量，优质抗体需超过95%。
给大家举两个真实检测案例：某抗体的相关函数曲线在100μs内快速衰减，PDI仅0.06，11nm左右的单一主峰占比100%，属于分散性极佳的优质样品；而另一款样品虽衰减较快，但曲线尾部拖尾，PDI达0.27，还出现了1049nm的大颗粒峰，说明存在轻微聚集，不适合用于关键实验。
其实很多科研人都忽略了“实验前质控”这一步。在抗体偶联、生物素化等关键实验前，用DLS做一次快速检测，就能有效筛选出优质样品，从源头避免因聚集问题导致的实验返工。如果检测发现PDI大于0.3，建议结合SEC-HPLC/SEC-MALS进一步验证，确保实验基础扎实。
科研路上，细节决定成败。有了DLS这位“质控好帮手”，就能精准把控抗体状态，保障实验的可重复性和结果准确性，让抗体发挥最佳性能，帮你少走弯路、高效出成果！
